4 Razões para Contaminação Durante Experimentos de PCR

Jan 26, 2022 Deixe um recado

Devido ao surto do novo coronavírus, a construção de laboratórios de amplificação de genes de PCR em vários locais se acelerou gradativamente. A detecção de ácido nucleico viral é um padrão importante para o diagnóstico de nova pneumonia coronariana. O laboratório de PCR, também conhecido como laboratório de amplificação de genes, adota a tecnologia de biologia molecular. Ao amplificar fragmentos de ácido nucleico, também pode ser considerado como uma replicação de ácido nucleico especial in vitro. O sistema de rastreamento de genes é usado para captar o conteúdo do vírus no corpo humano, e a precisão da detecção pode atingir o nível nanométrico. A detecção de ácido nucleico de novo coronavírus também pertence a essa categoria de tecnologia e é um padrão importante para o diagnóstico de nova pneumonia coronariana.

O laboratório de amplificação de genes de PCR amplifica principalmente o modelo de ácido nucleico de detecção. Pode-se observar que a contaminação cruzada é mais provável de ocorrer no laboratório, resultando em resultados falso-positivos nas amostras de teste. Portanto, os laboratórios de PCR têm requisitos e padrões rigorosos de design.

Agora a tecnologia de PCR tem sido amplamente utilizada nas áreas de doenças infecciosas, direcionamento de tumores, genética reprodutiva, etc. facilmente levar ao segundo, PCR Os requisitos técnicos são relativamente altos e o processo experimental é complicado. Se houver omissões nos links intermediários, resultados falsos negativos podem ser causados.

1. É a contaminação de produtos de amplificação por PCR. É também a causa mais comum de contaminação. Após a amplificação repetida de produtos de PCR, a quantidade de replicação excede em muito o limite de detecção de PCR, portanto, mesmo uma quantidade muito pequena de contaminação é suficiente para causar falsos positivos nos resultados experimentais.

2. Contaminação do reagente. Durante a preparação do reagente, o contato com recipientes, pipetas, pontas de pipeta, soluções, etc. contaminados pode levar à contaminação dos reagentes.

3. A amostra a ser testada está contaminada. O recipiente no qual a amostra é colocada está contaminado ou a amostra está contaminada devido à má vedação do recipiente; em segundo lugar, o uso de pipetas ou pontas de pipetas contaminadas durante o processo de extração de ácido nucleico levará à contaminação da amostra; além disso, algumas amostras contêm vírus. Se difundidos no ar, pode ocorrer contaminação cruzada.

4. Poluição por aerossóis. Se o aerossol contiver vírus e outros poluentes e se espalhar no ar, é muito provável que cause contaminação do produto de PCR. Os aerossóis são criados pelo atrito entre o ar e a superfície de um líquido. Abrir a tampa, agitar o tubo de reação e aspirar repetidamente o amostrador de contaminação pode formar aerossóis que podem levar à contaminação cruzada. Após o cálculo, uma partícula de aerossol pode conter 48,000 partes, portanto, atenção especial deve ser dada à poluição causada por aerossol. Enquanto o laboratório de PCR estiver contaminado, o relatório de resultado anterior é inválido e outras operações experimentais não podem ser realizadas. A fonte de contaminação deve ser identificada e completamente removida para obter resultados experimentais precisos e eficazes.