A reação em cadeia da polimerase (PCR) é um dos métodos mais conhecidos em laboratórios de ciências biológicas.
As placas de PCR são feitas de plástico de primeira classe para excelente manuseio e análise de amostras ou resultados coletados.
Eles têm paredes finas e uniformes que fornecem transferência de calor precisa.
Em preparação para aplicação em tempo real, pequenas frações de DNA ou RNA são isoladas e armazenadas em placas de PCR.
As placas de PCR são muito eficientes na selagem a quente e também restringem o fluxo de calor.
No entanto, como as placas de PCR são eficientes e confiáveis, elas são propensas a erros e imprecisões ao processar amostras.
Portanto, se você estiver interessado em obter placas de PCR de boa qualidade. É melhor entrar em contato com um fabricante confiável de placas de PCR. Com isso, você pode ter certeza de obter o melhor preço.
Abaixo estão algumas precauções para evitar a contaminação de reagentes ou amostras e para evitar resultados imprecisos.
Desinfete o ambiente
Resultados positivos ou negativos incorretos devido à presença de impurezas podem fazer você duvidar dos resultados.
Impurezas e contaminantes vêm em várias formas, como DNA não relacionado ou aditivos químicos, que acabam reduzindo a eficiência e eficácia da reação.
Existem muitas maneiras de reduzir significativamente a taxa de contaminação das placas de PCR.
Usar pontas de filtro esterilizadas é outra maneira útil de evitar que impurezas entrem na amostra através da pipeta.
Um conjunto de equipamentos completamente limpo, incluindo pipetas e racks, é fornecido especificamente para uso de PCR. Isso garantirá uma transferência insignificante de impurezas ou contaminantes pelo laboratório.
Use alvejante, etanol em pipetas, racks e bancadas para limpar a contaminação.
Aloque espaço reservado para todas as reações de PCR para reduzir ainda mais a contaminação por partículas.
Use luvas limpas em cada etapa e troque-as com frequência.
placa de PCR
Verifique a concentração e a pureza do modelo.
A limpeza das bancadas e equipamentos utilizados para análise de amostras por PCR deve ser mantida. É fundamental verificar a pureza das amostras antes da análise e processamento.
Normalmente, o analisador leva em consideração a concentração e o nível de pureza da amostra de DNA.
A taxa de absorção de 260nm/280nm não deve ser inferior a 1,8. As impurezas foram então identificadas usando comprimentos de onda entre 230nm e 320nm.
Em um exemplo, sais caotrópicos e outros compostos orgânicos foram detectados em uma absorbância de 230 nm. Detecte e verifique simultaneamente a turbidez em amostras de DNA em absorbância a 320 nm.
Evite sobrecarregar placas e produtos de PCR
Embora seja desejável processar vários produtos ao mesmo tempo, isso pode levar à contaminação cruzada das placas de PCR.
Sobrecarregar as placas de PCR com diferentes produtos é um desperdício e dificulta a identificação das amostras.
Manter registros de alíquotas de reagentes de PCR
Ciclos contínuos de congelamento/descongelamento e uso frequente de alíquotas podem danificar reagentes de PCR, enzimas e DNTPs por meio da recristalização.
Sempre se esforce para monitorar a taxa de alíquotas usadas ao preparar amostras para análise.
O LIMS preferido é mais adequado para controlar estoques e quantidades de reagentes e amostras a serem congeladas ou descongeladas.
Escolha a temperatura ideal de recozimento.
Escolher e usar a temperatura de recozimento errada é outra maneira de os resultados da PCR conterem erros.
Às vezes, a resposta não sai conforme o planejado. A temperatura de recozimento precisa ser reduzida para promover uma reação bem-sucedida.
No entanto, diminuir a temperatura aumenta a chance de falsos positivos e dímeros de primer.
Ao usar placas de PCR, é importante confirmar a análise da curva de fusão, pois é um bom indicador para escolher a temperatura correta de recozimento.
O software de design do primer ajuda no design, fornecendo a temperatura de recozimento correta, reduzindo diretamente os erros nas placas de PCR.
placa pcr
