Para doenças causadas por infecções virais, a fim de esclarecer os tipos de vírus a serem tratados, os seguintes dois tipos de inspeções podem ser realizados:
1. Detecção direta do próprio vírus
2. Ele pode detectar o antígeno na superfície do vírus e o ácido nucleico do vírus.
O teste identificou os anticorpos produzidos para resistir ao vírus:
Em circunstâncias normais, o teste de antígeno não requer condições laboratoriais elevadas e é adequado principalmente para triagem em grande escala em hospitais primários; O teste de anticorpos é fácil de operar e os resultados do teste podem ser obtidos em 10-15 minutos. A detecção de ácido nucléico requer muitas condições laboratoriais, pessoal intermitente e equipamento, mas a página de resultados é a mais sensível e precisa.
Dos 10 novos reagentes de detecção de ácido nucleico de coronavírus que foram aprovados, 8 deles usam o método de PCR fluorescente e os métodos de detecção restantes são o método combinado de sequenciação de polimerização ancorada em sonda e o método de chip de amplificação de temperatura constante.
1. Método de fluorescência PCR
O método de PCR refere-se à reação em cadeia da polimerase, que pode aumentar muito a quantidade de traços de DNA. Quando usado para detectar o novo coronavírus, porque o novo coronavírus é um vírus de RNA, é necessário fazer a transcrição reversa do RNA viral em DNA antes de realizar a detecção por PCR.
O princípio da detecção por PCR fluorescente é que, à medida que a PCR prossegue, os produtos da reação continuam a se acumular e a intensidade do sinal de fluorescência também aumenta proporcionalmente. Por fim, a variação da quantidade do produto é monitorada pela variação da intensidade da fluorescência, obtendo-se assim uma curva de amplificação da fluorescência.
Este é atualmente o método mais comumente usado para detecção de ácido nucléico do novo coronavírus. No entanto, os seguintes fatores podem causar erros nos resultados do teste:
Armazenamento impróprio ou falha no envio para teste: os vírus de RNA são facilmente degradados. Portanto, após a obtenção das amostras dos pacientes, elas precisam ser armazenadas de forma padronizada e testadas o mais rápido possível. Caso contrário, o resultado do teste provavelmente será impreciso.
Erro na interpretação dos resultados: Os produtos de teste atualmente aprovados são selecionados com base no quadro de leitura aberta 1a / b, proteína do envelope e proteína do nucleocapsídeo do novo genoma do coronavírus. No entanto, os primers de detecção e designs de sonda de produtos diferentes são diferentes e existem diferenças na detecção e interpretação de segmentos de alvo único, segmentos de alvo duplo e segmentos de três alvos. Portanto, se a interpretação não for estritamente realizada de acordo com as diferentes instruções, pode levar a um julgamento incorreto do resultado.
2. Método combinado de sequenciação de polimerização ancorada por sonda
Essa detecção é principalmente para usar um instrumento especial para detectar a sequência do gene transportada pelas nanoesferas de DNA na lâmina de sequenciamento.
Esse tipo de detecção tem alta sensibilidade e não é fácil perder o diagnóstico, mas os resultados também são facilmente afetados por muitos fatores, incluindo:
Amostras não testadas a tempo: Como no método de PCR fluorescente, os resultados podem ser imprecisos se não forem armazenados de maneira padronizada e testados o mais rápido possível.
A temperatura ambiente do local de teste está muito alta: isso também afetará a precisão dos resultados do teste. Diferentes instrumentos de teste e kits também podem afetar os resultados.
3. Método de chip de amplificação de temperatura constante
A detecção do chip do gene é um dos métodos tradicionais de diagnóstico virológico. O princípio de detecção é um método de detecção desenvolvido com base nas características de ligação complementar dos ácidos nucléicos, que podem ser usados para medir qualitativa ou quantitativamente os ácidos nucléicos presentes nos organismos. Comparado com o PCR, o chip do gene tem maior taxa de precisão e menor tempo, mas também é mais caro e a taxa de transferência de detecção (a quantidade de dados que pode ser gerada por unidade de tempo) é relativamente menor.
O chip do termostato aprovado desta vez pode detectar seis tipos de vírus respiratórios, incluindo o novo coronavírus. Os resultados podem ser obtidos em 1,5 horas,
Comparado com o PCR, o chip do gene tem maior taxa de precisão e menor tempo, mas o preço é mais caro e a taxa de transferência de detecção (a quantidade de dados que pode ser gerada por unidade de tempo) é relativamente menor.
4. Detecção de anticorpos de vírus
Os reagentes de detecção de anticorpos são usados para detectar anticorpos IgM ou IgG produzidos pelo corpo humano depois que o vírus entra no corpo humano. Os anticorpos IgM aparecem mais cedo e os anticorpos IgG mais tarde.
Atualmente, os cinco novos reagentes de detecção de anticorpos de coronavírus que foram aprovados usam o método do ouro coloidal e o método de quimioluminescência por partícula magnética.
5. Método de ouro coloidal
O método do ouro coloidal usa papel de teste de ouro coloidal para teste, que é o papel de teste rápido freqüentemente referido no momento.
Este tipo de papel de teste é especialmente marcado e tem orifícios, que é usado para pingar a amostra de soro do examinado. Existem duas linhas no papel de teste de ouro coloidal, uma é chamada de linha de teste e a outra é chamada de linha de controle de qualidade. Se ambas as linhas são coloridas, isso significa positivo; apenas a linha de controle de qualidade é colorida, o que significa negativo; exceto nestes dois casos, pertence a Resultado inválido.
