Qual é o significado da detecção de ácido nucleico por PCR, métodos e etapas
O teste de ácido nucléico é atualmente uma forma eficaz de determinar se o vírus é portador do novo coronavírus. No momento, as pessoas usam principalmente esfregaços nasais, esfregaços de garganta e anticorpos séricos lgm como referência. Mas, de acordo com os requisitos de entrada mais recentes de Cingapura, o teste de ácido nucleico de PCR é realizado, então o que significa o teste de ácido nucleico de PCR?
Qual é o significado da detecção de ácido nucleico por PCR
PCR significa reação em cadeia da polimerase, que pode ser usada para amplificar DNA, de modo a amplificar uma pequena quantidade de DNA a ponto de ser detectado. O ácido nucléico de alguns vírus é o DNA, e esse método precisa ser usado para detecção. Portanto, a PCR não é uma verificação realizada, mas um método de detecção de DNA. Por exemplo, a quantificação de DNA do vírus da hepatite B usa esse método. O objetivo da inspeção de DNA é diagnosticar a doença, por um lado. Se até mesmo o DNA do patógeno puder ser detectado, isso significa que o patógeno está infectado; por outro lado, é para julgar o quanto o vírus se replicou, para julgar a gravidade da doença ou o efeito do tratamento.
Métodos e etapas de detecção de ácido nucleico de PCR
O teste de ácido nucleico requer cinco etapas: amostragem, retenção de amostra, retenção, extração de ácido nucleico e teste de computador.
O primeiro passo na detecção de ácido nucléico é coletar secreções humanas e limpar a cavidade nasal ou parede posterior da faringe e tonsilas faríngeas bilaterais com um teste nasal ou faríngeo.
Na segunda etapa, a equipe médica guardava a amostra, imergia a cabeça do corpo-de-prova na solução de preservação celular e parafusava a tampa do tubo imediatamente após quebrar a cauda.
Na terceira parte, coloque a amostra em um saco hermético, guarde e envie para inspeção em tempo hábil.
A quarta etapa é enviar a amostra ao laboratório para extração do ácido nucléico.
Na quinta etapa, o extrato é submetido a uma reação de amplificação por PCR fluorescente.
O que é ácido nucléico
O ácido nucléico (ácido nucléico) é um tipo de macromolécula biológica composta por nucleotídeos (nucleotídeo), dividido em ácido ribonucleico (RNA) e ácido desoxirribonucléico (DNA), em que o RNA é principalmente uma estrutura de cadeia única, o DNA é principalmente uma estrutura de fita dupla. Além do príon, o ácido nucléico é uma macromolécula biológica necessária para a vida. Sua principal função é constituir o portador da informação genética da vida. Além disso, alguns ácidos nucleicos podem ser usados como e participar na formação de enzimas biologicamente ativas. Moléculas ou outras máquinas moleculares.
O que é teste de ácido nucléico
A detecção de ácido nucléico, como o nome indica, é para detectar ácidos nucléicos.
Quais são as vantagens exclusivas dos testes de ácido nucléico? Por que pode ser usado como o" padrão ouro" para o diagnóstico de novo coronavírus?
Na verdade, cada método de detecção tem seus próprios cenários de aplicação. Tomando a detecção de vírus como exemplo, o objeto de detecção dos métodos de detecção imunológica usuais (ouro coloidal, ELISA, quimioluminescência, etc.) é o antígeno ou anticorpo do vírus, que é equivalente a&desenho lateral" ;. Como há uma janela de tempo entre a infecção e a detectabilidade, os métodos de detecção imunológica geralmente não são adequados para o diagnóstico precoce.
Qual é o significado da detecção de ácido nucleico por PCR, métodos e etapas
Falsos positivos e falsos negativos
1. Falso positivo
Geralmente, há menos falsos positivos. Geralmente, a operação inadequada do pessoal do laboratório pode levar à contaminação cruzada entre as amostras ou contaminação residual dos produtos amplificados. Nesse caso, falsos positivos podem ser causados.
No entanto, os falsos positivos podem ser contornados com eficácia controlando estritamente o processo de detecção e implementando uma estratégia de participação aleatória na detecção de várias amostras negativas.
2. Falso negativo
O que precisa ser explicado aqui é que os falsos negativos na detecção de PCR e os falsos negativos clínicos não são, na verdade, o mesmo conceito.
Tomando como exemplo o diagnóstico do novo coronavírus, que é discutido intensamente na Internet, os falsos negativos clínicos referem-se a casos em que os sintomas clínicos e os estudos de imagem são altamente suspeitos de estarem infectados, mas o teste de PCR é repetidamente ou sempre negativo; e o teste de PCR falso negativo refere-se ao coletado. Há uma quantidade suficiente do novo coronavírus na amostra, mas ele não foi detectado.
Para evitar falsos negativos no teste de ácido nucleico, as principais necessidades a serem resolvidas são: (1) há vírus suficiente nas células da pessoa infectada, (2) células contendo o vírus podem ser coletadas na amostra coletada, e (3) ) o vírus na amostra é detectado Esses três links.
Entre eles, os parâmetros técnicos dos kits de PCR afetam principalmente o terceiro elo de detecção.
Apenas para o terceiro link de teste, se o número de vírus na amostra estiver abaixo de um determinado nível (abaixo do limite mínimo de detecção), o kit PCR não será capaz de detectá-lo. Dessa perspectiva, os falsos negativos na detecção de PCR não podem ser completamente evitados. É por isso que é necessário complementar o desenvolvimento de testes de anticorpos específicos para vírus.
