O princípio da PCR é usar DNA que desnatura e torna-se de fita simples a uma temperatura elevada de 95 ° C in vitro. Em baixas temperaturas (geralmente em torno de 60 ° C), os primers e as fitas simples são combinados de acordo com o princípio do emparelhamento complementar de bases e, em seguida, a temperatura é ajustada para a DNA polimerase. Na temperatura ótima de reação (em torno de 72 ° C), a DNA polimerase sintetiza fitas complementares ao longo da direção do ácido fosfórico em cinco açúcares de carbono (5' -3').
A área de aplicação mais valiosa da PCR é o diagnóstico de doenças infecciosas. Em teoria, enquanto houver um patógeno na amostra, a PCR pode ser detectada.
Em experimentos, descobriu-se que o DNA também pode ser desnaturado e derretido em altas temperaturas, e pode ser renaturado em fitas duplas novamente quando a temperatura é reduzida. Portanto, ao controlar a desnaturação e renaturação do DNA por mudanças de temperatura, a adição de primers de design, a DNA polimerase e os dNTPs podem completar a replicação in vitro de genes específicos.
No entanto, a DNA polimerase será inativada em altas temperaturas. Portanto, uma nova DNA polimerase deve ser adicionada a cada ciclo, o que não só é complicado de operar, mas também caro, o que restringe a aplicação e o desenvolvimento da tecnologia de PCR.
